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编号:13837393
基于GC-MS技术研究地芬诺酯对大鼠肝脏组织代谢的影响(2)
http://www.100md.com 2020年6月5日 《中国当代医药》 202016
     样品提取和衍生化方法:称取100 g冷冻肝组织,加入预冷250 μl乙腈沉淀蛋白[10]。然后使用SCIENTZ-48组织磨机研磨2 min,研磨参数为64 Hz,1800 r/min。再将EP管涡旋混合1 min,冰浴15 min,4℃ 10 000 g离心10 min。取200 μl上清液真空冷冻干燥24 h。冻干粉在70 ℃下加入50 μl甲基羟胺盐酸盐(15 mg/ml,吡啶)1 h,然后加入50 μl MSTFA(以1% TMCS为催化剂),加入150 μl正庚烷后终止衍生化。

    1.4数据处理和模式识别

    对地芬诺酯组和对照组的肝组织进行GC-MS分析。信噪比>3的峰被采纳。这些峰被放入NIST2010质谱数据库中进行检索。鉴定结果采取匹配度在70%以上的代谢物。为了补偿样品浓度的差异,对代谢物数据进行归一化处理。采用独立样本t检验统计比较代谢物水平,找出不同的化合物。以P<0.05为差异有统计学意义。将标准化值导入SIMCA-P+11.0软件(Umetrics,Umea,瑞典),采用PLS-DA多因素分析方法对地芬诺酯组与对照组进行分析 ......
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